Hvað er PCR greining?
Greining á pólýmerasa keðjuverkun (PCR) er rannsóknarstofa sem er ætlað að greina lítið magn af DNA í sýni með aðferð sem kallast mögnun . Við PCR mögnun er DNA af áhugasviðinu afritað ítrekað þar til það er nóg af því til greiningu og uppgötvunar. Til dæmis getur PCR verið notað til að auðkenna lítið magn af DNA frá lífverum sem valda gonorrhea eða klamydíu sem eru til staðar í þvagi .
Hvernig virkar PCR vinna?
Fyrsta skrefið í PCR er að hita sýnið þannig að tvöfaltstrengið DNA skili sér í tvær einingar þræðir - þetta er kallað denaturation . Þá eru grunnar , stuttar sýni af DNA sem passa allt að endum DNA-röðar af áhuga, sameinuð með sýnatöku DNA. Eftir þetta er DNA pólýmerasa notað til að hefja DNA afritunar á grunnsstaðnum. Að lokum er DNA hitað til að aðskilja strengina einu sinni enn og allt PCR ferlið hefst aftur.
Magn DNA sviðsins sem er til staðar í sýninu eykst veldishraða með hverri PCR hringrás: ein afrit verður tvö, þá verður fjórði, þá verður átta, etc; svo almennt er aðeins þörf á 20 til 40 lotum til að ákvarða hvort viðkomandi DNA sé til staðar (og ef það er til þess að veita nægilegt sýni til greiningar).
Allar skrefarnar í fjölliðunarkeðjubreytingu - denaturering DNA, beitingu frumanna og lengingu DNA - gerast við mismunandi hitastig, svo eftir að fyrstu blandan er sameinuð, er hægt að stýra skrefin með ferli sem kallast hitaþol , þar sem hitastigið er haldið á nauðsynlegum stigum fyrir bara nógu lengi fyrir hvert skref að eiga sér stað.
Þannig er PCR skilvirk leið til að magnka magn DNA markaðar í einum prófunarrör með lítilli þörf fyrir inngrip manna.
Polymerase keðjuverkun táknaði byltingu í líffræðilegri tækni þegar hún var fyrst þróuð í byrjun níunda áratugarins, og skapari PCR, Kary Mullis, vann Nóbelsverðlaun í efnafræði fyrir störf hans árið 1993.
Afhverju er PCR viðeigandi fyrir STD prófun?
Pólýmerasa keðjuverkun og tengdar tækni, eins og leifaskeðjubreytingar , reynast vera vaxandi mikilvægi fyrir STD prófun. Þetta er vegna þess að þessar aðferðir geta beint greint lítið magn af veiru DNA eða RNA í sýnum. Að bera kennsl á erfðafræðilega kóða sjúkdómsins krefst ekki þess að sjúkdómsvaldið sé lifandi - eins og bakteríukultur eða veirufræðingur . Það krefst þess einnig að sýkingin hafi átt sér stað fyrir löngu síðan að fólk hafi þróað greinanlegan mótefnaviðbrögð (eins og það er greint með ELISA .) Þetta þýðir að PCR tækni getur stundum greint sjúkdóma fyrr en aðrar prófanir og án eins mikið þarf að hafa áhyggjur af því að halda sýni á lífi eða prófa á nákvæmlega réttum tíma.