Hvað er karyotype próf og hvernig er það gert?

Tilgangur og stakir þátt í karyotype Test

Ef læknirinn hefur mælt með karyótíuprófi fyrir þig eða barnið þitt eða eftir amnocentesis, hvað felur þetta próf í sér? Hvaða skilyrði geta verið að greina karyotype, hvað eru þrepin þátt í að gera prófanirnar og hvað eru takmarkanir þess?

Hvað er karyotype próf?

Karyotype er mynd af litningunum í frumu . Karyotypes má taka úr blóðfrumum, húðfrumum úr fóstri (frá fósturvökva eða fylgju) eða beinmergsfrumur.

Hvaða skilyrði má greina með karyotype Test?

Karyotypes er hægt að nota til að skimma fyrir og staðfesta afbrigði afbrigði eins og Downs heilkenni og það eru nokkrar mismunandi tegundir afbrigða sem geta komið fyrir.

Eitt þessara er trisomies þar sem þrír eintök af einum litningunum eru frekar en tveir. Í mótsögn koma einstæðar myndir fram þegar aðeins eitt eintak (í stað tveggja) er til staðar. Auk trisomies og monosomies eru litabreytingar þar sem hluti af litningi er vantar og litabreytingar, þar sem hluti af litningi er tengt öðru litningi (og öfugt í jafnvægi translocations.)

Dæmi um trisomies eru:

• Down heilkenni (trisomy 21)
• Edward heilkenni ( trisomy 18 )
• Patau heilkenni (trisomy 13)
• Klinefelter heilkenni (XXY og aðrar tilbrigði) - Klinefelter heilkenni kemur fram hjá 1 af hverjum 500 nýfæddum körlum og virðist aukast í tíðni

• Triple X heilkenni (XXX)

Dæmi um mónósóm inniheldur:

• Turner heilkenni (X0) eða monosomy X - U.þ.b. 15 prósent af fósturláti stafar af Turner heilkenni en þessi trisomy er aðeins til staðar í kringum 1 af 2000 lifandi fæðingum

Dæmi um afbrigði af litningum eru:

• Cri-du-Chat heilkenni (vantar litningi 5)

• Williams heilkenni (vantar litningi 7)

Translocations - Það eru mörg dæmi um translocations þ.mt translocation Down heilkenni. Robertsonian translocations eru nokkuð algengar, sem koma fram hjá u.þ.b. 1 af hverjum 1000 einstaklingum.

Mosaicism er ástand þar sem sumar frumur í líkamanum hafa afbrigðilegu litningabreytingar á meðan aðrir ekki. Til dæmis mósaík Down heilkenni eða mósaík trisomy 9. Full trisomy 9 er ekki samhæft við líf, en mósaík trisomy 9 getur leitt til lifandi fæðingu.

(Dæmi er þess virði að þúsund orð eru til staðar. Lærðu um muninn á þýðingu, trisomy og mósaík Down heilkenni .)

Hvenær er Karyotype lokið?

Það eru margar aðstæður þar sem læknirinn getur mælt með karyotype. Þetta gæti falið í sér:

• Ungbörn eða börn sem eru með sjúkdóma sem benda til óeðlilegrar krómóskapar sem hefur ekki enn verið greind.
• Fullorðnir sem hafa einkenni sem benda til litabreytingar (td karlar með Klinefelter-sjúkdóm geta farið óþekkt eftir kynþroska eða fullorðinsárum.) Sumar truflanir á mórusíkrjóvgun geta einnig farið ómögulegar.
• Ófrjósemi - Erfitt karyotype má gera fyrir ófrjósemi. Eins og fram kemur hér að framan, geta sumar afbrigði afbrigðileika farið ómagnað til fullorðinsárs. Kona með Turner heilkenni eða karl með einum afbrigði Klinefelter er ekki víst að ástandið sé til staðar þar til þau eru með ófrjósemi.

• Prenatal próf - Í sumum tilfellum, svo sem eins og transposition Down heilkenni, getur ástandið verið arfgengt og foreldrar má prófa ef barn hefur verið fædd með Downs heilkenni. (Það er mikilvægt að hafa í huga að mestu leyti af Downs heilkenni er ekki arfgengur sjúkdómur heldur heldur stökkbreyting.)
• Stillbirth - Karyotype er oft gert sem hluti af prófuninni eftir dauðsföll.
• Endurteknar miscarriages - Foreldrar karyotype endurteknar miscarriages geta gefið vísbendingar um ástæður þessara hrikalegra endurtekinna taps. Talið er að litningabreytingar, eins og trisomy 16, séu orsök að minnsta kosti 50 prósent af miscarriages.

• Kyrningahvítblæði - Karyotype prófun getur einnig verið gert til að hjálpa til við að greina hvítfrumna, til dæmis með því að leita að litróf litrófinu sem finnast hjá sumum sjúklingum með langvarandi mergbreytilegt hvítblæði eða brátt eitilfrumuhvítblæði.

Skref þátt í Karyotype Test

Karyótíupróf kann að hljóma eins og einföld blóðpróf, sem gerir mörgum furða hvers vegna það tekur svo langan tíma að fá niðurstöðurnar. Þessi prófun er í raun mjög flókin eftir innheimtu. Við skulum skoða þessi skref þannig að þú getir skilið hvað er að gerast á þeim tíma sem þú ert að bíða eftir prófinu.

1. Sýnishorn

Fyrsta skrefið í að framkvæma karyotype er að safna sýni. Hjá nýburum er safnað blóðsýni sem inniheldur rauð blóðkorn, hvít blóðkorn, sermi og önnur vökva. Karyotype verður gert á hvítum blóðkornum sem eru virkir aðgreina (ástand sem kallast mítósi). Meðan á meðgöngu stendur getur sýnið annaðhvort verið fósturlát vökva sem safnað er meðan á amniocentesis eða stykki af fylgjunni er safnað meðan á sýnatökuprófi (chorionic villi sampling) stendur. Fósturvísirinn inniheldur fósturhúðfrumur sem eru notaðir til að mynda karyotype.

2. Flutningur til rannsóknarstofunnar

Karyotypes eru gerðar á sérstökum rannsóknarstofu sem kallast frumueyðandi rannsóknarstofa - rannsóknarstofa sem rannsakar litninga. Ekki eru allir sjúkrahúsum með rannsóknir á frumueyðandi lyfjum. Ef sjúkrahúsið þitt eða læknastofnunin hefur ekki sitt eigið frumueyðandi rannsóknarstofu, verður sýnishornið sent í rannsóknarstofu sem sérhæfir sig í karyotype greiningu. Prófunarsýnið er greind með sérstaklega þjálfaðir frumudrepandi tæknimenn, Ph.D. frumueyðandi, eða erfðafræðingar.

3. Aðskilja frumurnar

Í því skyni að greina litninga skal sýnið innihalda frumur sem skiptast á virkan hátt. Í blóði skiptast hvítar blóðfrumur virkan. Flestir fósturfrumur skiptast einnig virkan. Þegar sýnið hefur náð sýklalyfjafyrirtækinu eru þau óskilduð frumur aðskilin frá skiptifrumum með sérstökum efnum.

4. Vaxandi frumur

Til þess að fá nóg frumur til að greina, skiptast frumurnar í sérstökum fjölmiðlum eða frumurækt. Þessi fjölmiðla inniheldur efni og hormón sem gera frumunum kleift að skipta og margfalda. Þetta ferli ræktunar getur tekið 3-4 daga fyrir blóðfrumur og allt að viku fyrir fósturfrumur.

5. Samstilling frumna

Litningarnir eru langir strengir manna DNA. Til þess að sjá litningana undir smásjá verður litningurinn að vera í samsöfnuðu formi í fasa frumuskiptingar (mítósi) sem kallast metafasi. Til þess að fá allar frumurnar til þessa tilteknu stigs frumuskiptingar, eru frumurnar meðhöndluð með efna sem hindrar frumuskiptingu á þeim stað þar sem litningarnir eru mest samningur.

6. Slepptu litningunum úr frumum þeirra

Til þess að sjá þessa samdrættu litningarnar undir smásjá, þurfa litningarnir að vera út úr hvítum blóðkornum. Þetta er gert með því að meðhöndla hvíta blóðkornin með sérstakri lausn sem veldur því að þau springa. Þetta er gert meðan frumurnar eru á smásjá. The rusl rusl frá hvítum blóðkornum er skolað í burtu, þannig að litningarnir liggja á glærunni.

7. Litning litninganna

Litningarnir eru náttúrulega litlausir. Til að segja eitt litningi frá öðru er sérstakt litarefni sem heitir Giemsa litarefni beitt á glæruna. Giemsa litarefni blettir svæði litninga sem eru ríkir í basa adeníni (A) og týmíni (T). Þegar litað eru litningarnir líta út eins og strengir með ljósum og dökkum hljómsveitum. Hvert litningi hefur sérstakt mynstur af léttum og dökkum hljómsveitum sem gerir frumueinafræðingunni kleift að segja eitt litningi frá öðru. Hvert dökk eða ljósband nær yfir hundruð mismunandi gena.

8. Greining

Þegar litningarnir eru litaðar er glæran sett undir smásjá til greiningar. Mynd er síðan tekin af litningunum. Í lok greiningarinnar verður heildarfjöldi litninganna ákvörðuð og litningarnir raðað eftir stærð.

9. Talning litninga

Fyrsta skrefið í greiningunni er að reikna litningarnar. Flestir menn hafa 46 litninga. Fólk með Downs heilkenni hefur 47 litninga. Það er líka mögulegt fyrir fólk að hafa vantar litning, meira en eitt viðbót litningagreinar eða hluti af litningi sem annaðhvort vantar eða tvíverknað. Með því að skoða bara fjölda litninga er hægt að greina mismunandi aðstæður, þar á meðal Downs heilkenni.

10. Flokkun litninga

Eftir að ákvarða fjölda litninganna mun frumueyðandi rannsakandi hefja flokkun litninganna. Til að flokka litningarnar mun frumueinafræðingurinn bera saman litningarlengd, staðsetningu miðjamanna (svæðin þar sem tveir litningarnir eru tengdir) og staðsetning og stærðir G-bandanna. Litningarnir eru talnar frá stærstu (númer 1) til minnstu (númer 22). Það eru 22 pör af litningum, sem kallast autosomes, sem passa nákvæmlega saman. Það eru líka kynlíf litningarnir, konur eru með tvær X litninga en karlar hafa X og Y.

11. Að horfa á uppbyggingu

Auk þess að horfa á heildarfjölda litninganna og kynlíf litninganna, mun frumueinafræðingurinn einnig líta á uppbyggingu sérstakra litninganna til að ganga úr skugga um að engin vantar eða viðbótar efni sé til staðar sem og breytingar á uppbyggingu eins og þýðingar. Flutningur á sér stað þegar hluti af litningi er tengt öðru litningi. Í sumum tilfellum eru tveir litlar litningabreytingar skiptir (jafnvægisskipting) og stundum er aukið stykki bætt við eða vantar úr einum litningi einn.

12. Endanleg niðurstaða

Að lokum sýnir endanleg karyotype heildarfjölda litninga, kynlífsins og hvers kyns óeðlilegar breytingar á einstökum litningum. Stafræn mynd af litningunum er mynduð með öllum litningunum raðað eftir fjölda.

Takmarkanir á karyotype Testing

Mikilvægt er að hafa í huga að á meðan karyotype prófun getur gefið mikið af upplýsingum um litning, getur þetta próf ekki sagt þér hvort tiltekin gen stökkbreytingar, svo sem þær sem valda truflun á blöðruhálskirtli , eru til staðar. Erfðafræðingur þinn getur hjálpað þér að skilja bæði hvað karyotype prófanir geta sagt þér og hvað þeir geta ekki. Nánari rannsóknir eru nauðsynlegar til að meta hugsanlegt hlutverk stökkbreytinga í sjúkdómi eða fósturláti.

Það er einnig mikilvægt að hafa í huga að stundum getur karyotype próf ekki greint frá litabreytingum, svo sem þegar mótefnavaka í mæðrum er til staðar.

Framtíðin

Á sama tíma er karyotype próf í fósturskemmtuninni alveg innrásar, þar sem krafist er amniocentesis eða chorionic villus sýnatöku. Rannsóknir eru í gangi við að meta frumufrítt DNA í blóðsýni móðurs sem miklu minna óbeint val fyrir greiningu á erfðafræðilegum afbrigðum fósturs í fóstur.

Bottom Line á bíða eftir Karyotype árangur þinn

Þó að bíða eftir karyotype niðurstöðum getur verið að þú sért mjög kvíðin og vikan eða tvo það tekur til að ná árangri getur fundið fyrir eyrum. Taktu þann tíma til að halla á vinum þínum og fjölskyldu. Að læra um sumar aðstæður sem tengjast óeðlilegum litningi getur einnig verið gagnlegt. Þó að mörg skilyrði sem eru greind með karyotype geta verið hrikalegt, þá eru margir sem búa við þessar aðstæður sem hafa framúrskarandi lífsgæði.

> Heimildir

• > Kumar, Vinay, Abul K. Abbas og Jón C. Aster. Robbins og Cotran Pathologic Grunnur sjúkdóms. Philadelphia: Elsevier-Saunders, 2015. Prenta.
• > Norton, M. og B. Rink. Breyting á vísbendingum um innrásarprófun á tímum betri sýnunar. Málstofur í fæðingarfræði . 2016. 40 (1): 56-66.
• > Shah, M., Cinnioglu, C., Maisenbacher, M., Comstock, I., Kort, J., og R. Lathi. Samanburður á cýtogenetics og Molecular Karyotyping fyrir litningagreiningu á fósturláti. Frjósemi og dauðhreinsun . 2017. 107 (4): 1028-1033.